抗HA标签抗体偶联磁珠

产品货号：

M20010

中文名称：

抗HA标签抗体偶联磁珠

英文名称：

Anti-HA Magnetic Beads

产品规格：

1ml|1ml×5

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本制品由高质量的鼠源单克隆抗体与氨基磁珠共价偶联制备，具有较高的HA标签融合蛋白加载容量，可用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中HA标记蛋白的免疫沉淀(IP)。本产品可以通过磁力架或自动分离仪器分离，实验便捷有效。本产品蛋白核载量高，特异性强，也可用于免疫共沉淀(Co-IP)和小量的蛋白质纯化。

基本信息

磁珠尺寸：2μm
抗体亚型：鼠源IgG3a
抗体纯化方法：Protein A纯化制备
推荐使用量：每500μL细胞裂解液使用10μL磁珠
融合蛋白结合量：＞0.6mg/mL
适用范围：免疫沉淀(IP)，HA-tag蛋白纯化
保存条件：4℃，有效期2年

自备试剂

PBST:1×PBS + 0.5% Tween-20,pH7.4

注意事项

本产品pH值为6～8，禁止冻结。
本产品应避免离心、干燥或冻存，禁止长时间置于磁场，可能会引起磁珠聚团，样品结合后操作过程应轻柔，避免抗原脱落。
使用本产品进行IP实验前，需先确认样品中HA融合蛋白的表达情况。
为最大限度的降低蛋白质降解，请配合使用我司蛋白酶抑制剂Cocktail(货号：M20001，M20002)。
不要使用含dithiothreitol (DTT)的细胞裂解液样品，DTT可能会引起磁珠上的HA抗体脱落。
本产品仅用于专业人员的科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

磁珠预处理
混悬Anti-HA Magnetic Beads，取10μL磁珠，置于1.5mL EP管中，加入500μL洗涤缓冲液，充分混悬，置于磁力架上磁性分离，弃上清。重复以上洗涤步骤2次。
样品的结合
在上述分离得到的磁珠中加入500μL细胞裂解液，充分混悬，置于翻转混合仪孵育，室温孵育2小时或者4℃条件下孵育过夜。置于磁力架上磁性分离，弃上清。
注意：结合过程中，磁珠可能会出现聚团或呈片状，属于正常现象，不会影响实验结果。
洗涤
在上述分离得到的磁珠中加入500μL洗涤缓冲液，充分混悬磁珠，磁性分离，弃上清。重复以上洗涤步骤3次。
洗脱
在上述分离得到的磁珠中加入50μL的1×蛋白上样缓冲液，95℃加热5分钟。冷却后，磁性分离，取上清进行SDS-PAGE检测。

检测结果条带背景过高？
- 可能是由于蛋白非特异性结合到抗体、磁珠或EP管上，建议对裂解液
  进行预处理，去除非特异结合的蛋白；在最后一次洗涤前，转移整个样品
  到新的EP管中，然后磁性分离或离心分离。
- 洗涤效果不佳，也会导致条带较高的背景，建议增加洗涤时间与次数。
检测结果无条带？
- HA标签蛋白没有表达可能导致检测结果无条带，建议操作：
  - 确保目的蛋白带有HA标签；
  - 制备新鲜的裂解液；
  - 使用恰当的蛋白酶抑制剂(货号：M20001，M20002)。
- 孵育时间不足可能导致检测结果无条带，建议延长孵育时间。
- 裂解液中存在高浓度的DTT、2-巯基乙醇或其他的还原剂等干扰物质，建议选用合适的裂解液。

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